کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا (HPLC)

کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا

آنالیز HPLC

آنالیز HPLC یا کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا (High Efficiency Liquid Chromatography)، مناسب برای آنالیز و جداسازی ترکیبات شیمیایی و گیاهی بوده و در زمینه های مختلف شیمی، داروسازی، شیمی صنعتی و تشخیص های کلینیکی کاربرد دارد. آنالیز HPLC یا کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا سریعترین رشد را در بین تمام فنون جداسازی تجزیه ای با فروش سالیانه در گستره میلیارد دلار داشته است. آنالیز کیفی، برای تشخیص و شناسایی نوع ترکیبات انجام میشود.

آنالیز HPLC یا کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (که گاهی به آن کروماتوگرافی مایع با فشار بالا گفته می شود)، آنالیز HPLC­، یک روش کروماتوگرافی است که می تواند مخلوطی از ترکیبات را از هم جدا کند و در بیوشیمی و شیمی تحلیلی برای شناسایی کمیت و خالص سازی اجزای مخلوط استفاده می شود. آنالیز HPLC به طور معمول از انواع مختلفی از مراحل ثابت استفاده می کند، پمپی که فاز (های) متحرک و آنالیت را از طریق ستون و یک آشکارساز حرکت می دهد تا زمان احتمالی حفظ آنالیت را فراهم کند. دتکتور همچنین ممکن است اطلاعات اضافی مربوط به آنالیت، (یعنی داده های طیف سنجی UV­/­Vis را برای آنالیت در صورت مجهز بودن) فراهم کند. مدت زمان نگهداری آنالیت بسته به استحکام فعل و انفعال آن با فاز ثابت، نسبت­ترکیب حلال (های) مورد استفاده و سرعت جریان فاز متحرک متغیر است. این نوعی کروماتوگرافی مایع است که از اندازه ستون کوچکتر، واسطه کوچکتر در داخل ستون و فشار بالاتر فاز متحرک استفاده می کند .

پمپ فشار بیشتری را برای جابجایی فاز متحرک و آنالیت از طریق ستون متراکم فراهم می کند. افزایش تراکم از اندازه ذرات کوچکتر ناشی می شود. این امر باعث می شود در مقایسه با کروماتوگرافی ستونی معمولی، جدایی بهتری در ستون هایی با طول کمتر وجود داشته باشد. نمونه ای که باید مورد آنالیز  قرار گیرد یا از هم جدا شود در حجم کم، به جریان فاز متحرک وارد می شود. محلول منتقل شده از طریق ستون با اثر متقابل شیمیایی یا فیزیکی خاص با فاز ثابت موجود در ستون کاهش می یابد. سرعت محلول بستگی به ماهیت نمونه و ترکیبات مرحله ثابت (ستون) دارد.

زمانیکه نمونه از انتهاي ستون خارج مي شود زمان نگهداري ناميده مي شود. زمان نگهداري در شرايط خاص ويژگي شناسايي يك نمونه معين در نظر گرفته مي شود. استفاده از ستونی با اندازه ذرات کوچکتر (که باعث فشار کمتری می شود) سرعت خطی را افزایش می دهد و باعث می شود زمان کمتری برای انتشار در داخل ستون و بهبود وضوح کروماتوگرام باشد. حلالهای رایج استفاده شده شامل ترکیب حل شدنی از آب یا مایعات ارگانیک مختلف (رایج ترین آنها متانول و استونیتریل) است. آب ممکن است حاوی بافر یا نمکی برای جداسازی اجزای نمونه باشد یا ترکیباتی مانند اسید تری فلوئوراستریک که به عنوان ماده جفت کننده یون عمل می کند.

 

کاربردهای آنالیز HPLC

  • آنالیز مواد غذایی و طعم دهنده ها
  • غربالگری سریع و آنالیز اجزای موجود در نوشیدنی های غیر الکلی
  • آنالیز چند هسته ای 301 سموم دفع آفات در نمونه های مواد غذایی توسط کروماتوگراف طیف سنجی جرمی
  • تحلیل محیطی
  • برای داروها و محصولات مراقبت شخصی در آب، خاک، رسوبات و زیست بومها توسط HPLC / MS / MS
  • جداسازی سریع و شناسایی ترکیبات کربونیل توسط HPLC
  • آنالیز شیمیایی تخصصی
  • آنالیز ترکیبات آنتی اکسیدان فنلی و اروکامید در پلیمر با استفاده از سرعت سریع LC
  • یک محلول کامل برای آنالیز ملامین واسید سیانوریک در غذای حیوانات اهلی توسط GC­/­MS و آبی فاز طبیعی LC / MS / MS
  • آنالیز پزشکی قانونی
  • تعیین بنزودیازپین ها در مایعات خوراکی با استفاده از LC / MS / MS
  • آنالیز پروفایل ناخالصی دارویی
  • پروفایل ناخالصی با سیستم LC
  • آنالیز کشف ترکیبات دارویی

اشتراک گذاری :

دیدگاه خود را ارسال کنید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد.

برای درج نظر می بایست لاگین کنید

مقالات مرتبط

آنالیز ساختار مواد با استفاده از دستگاه اشعه ایکس(XRF)
1403/06/21

آشنایی با آنالیز XRD و کاربردهای آن

پراش اشعه ایکس یا آنالیز XRD، دستگاهی است برای اندازه گیری فواصل صفحات اتمی یا به عبارتی شناسایی ساختمان مواد که نتیجه آن تعیین نام کانی یا کانی های تشکیل دهنده نمونه می باشد. دستگاه طیف سنج پراش اشعه ایکس XRD به طور وسیعی در شناسایی نمونه های مجهول جامد کریستالی مورد استفاده قرار می گیرد. از جمله مواردی که میتوان در XRD تعیین کرد تشخیص فاز کریستال، اندازه و شکل دانه کریستال، ترکیب اتمهای کریستال و ساختار آن و … میباشد. الگوی پراش اشعه X برای هر ماده، یکتا و منحصر به فردی میباشد.

آنالیز اشعه ایکس با استفاده از دستگاه طیف سنج XRF
1403/07/02

طیف سنج فلوئورسانس اشعه ایکس (X Ray Fluorescence)

فلوئورسانس پرتو اشعه ایکس یا آنالیز XRF انتشار مشخصه “ثانویه” (یا فلوئورسنت) اشعه X از ماده ای است که با بمباران پرتوهای پر انرژی X یا پرتوهای گاما برانگیخته شده است.

لوزی خطر
1403/10/03

لوزی خطر

انجمن ملی حفاظت حریق آمریکا (NFPA) استانداردی را تحت عنوان NFPA 704 تدوین کرد که برای شناسایی خطرات مواد (علی الخصوص مواد شیمیایی) به کار می رود. در بین کارشناسان ایمنی و بهداشت حرفه ای، این استاندارد به لوزی خطر (Hazard Diamond) مشهور شده است. به نظر می رسد لوزی نجات، شاید اسم مناسب تری برای لوزی خطر می بود!

pH متری و روش های آن
1403/10/03

pH متری و روش های آن

pH آب غلظت یون های هیدروژن و اسیدیته یا قلیایی بودن آن را مشخص می کند. آب خالص به میزان خیلی کم به یون های H و OH تجزیه می شود. pH آب آشامیدنی معمولا باید در حدود 7 (خنثی) باشد. در حالتی که pH کمتر از 7 باشد، آب حالت اسیدی و در صورت pH بالای 7 باشد، آب خاصیت قلیایی به خود می گیرد.

غشاهای شیشه ای
1403/10/03

غشاهای شیشه ای

یک شیشه ی سیلیکاتی به کار رفته برای غشاهای شیشه ای متشکل از یک ساختار سه بعدی نامتناهی از گروه های SiO4 چهار بار منفی است که در آن هر سیلیسیم به چهار اکسیژن و هر اکسیژن به دو سیلیسیم پیوند شده است. در درون شبکه ی این ساختار کاتیون های کافی وجود دارند تا بار منفی گروه سیلیکات را خنثی کنند. کاتیون های تکبار مانند سدیم و لیتیم در شبکه حرکت می کنند و مسئول رسانش الکتریکی در درون غشا هستند.

دستگاه اتولب
1403/10/04

دستگاه اتولب

دستگاه اتولب یک انتخاب ایده آل برای کسانی است که به دنبال آنالایزر الکتروشیمیایی کم هزینه و فشرده اما با کارایی بالا هستند. کاملاً با نرم افزار NOVA یکپارچه شده است، این ابزار جمع و جور می تواند اندازه گیری مقاومت در فرکانس میکروهرتز تا مگاهرتز را انجام دهد.

طیف سنج مادون قرمز
1403/10/04

طیف سنج مادون قرمز FTIR

طیف سنج مادون قرمز (FTIR) روشی است که دانشمندان برای تعیین ساختار مولکولها با جذب مشخصه مولکولها از اشعه مادون قرمز استفاده می کنند. طیف مادون قرمز طیف ارتعاشی مولکولی است. در هنگام قرار گرفتن در معرض اشعه مادون قرمز، مولکولهای نمونه به صورت انتخابی تابش طول موجهای خاص را جذب می کنند که باعث تغییر لحظه دو قطبی مولکولهای نمونه می شود.

اسپکتروفتومتر
1403/10/05

UV-Vis یا طیف سنج مرئی فرابنفش (اسپکتروفتومتر)

اسپکتروفتومتر یا طیف سنج مرئی و ماوراء بنفش که گاهی یو وی هم نامیده می شود، دستگاهی برای اندازه گیری مقدار یک ماده بر اساس میزان جذب الکترومغناطیسی آن ماده می باشد.